井伊直虎（生年不明－1582年9月12日）是日本戰國時代的女性領主，遠江國國眾井伊氏（日语：井伊氏）的當家，通称次郎法師、渾名女地頭，戒名月泉祐圓禅定尼、妙雲院殿月船祐円大姉。父親為井伊氏22代當主井伊直盛^{[2][註解 1]}，與井伊氏23代當主井伊直親有過婚約^[1]，但卻終生未婚。其也是德川四天王之一井伊直政的養母及族母。

一說生於天文5年，天文11年（1542年），祖父井伊直宗因為參與三河国田原城的攻城而戰死，父親直盛因為無兒子，因此計划將直盛之堂弟井伊直親（直盛的叔父井伊直滿的兒子）作為自己的婿養子，與直親訂下婚約。^[1]

但天文13年（1544年），因為井伊氏家老小野道高（政直）的密告，直滿及其弟弟井伊直義（日语：井伊直義）被懷疑意圖謀反而被今川義元下令自殺，直親也因此逃亡到與井伊氏菩提寺龍泰寺（後來的龍潭寺（日语：龍潭寺 (浜松市)））有淵源的信濃國伊那郡（日语：伊那郡）松源寺。為了守住直親逃亡的秘密，井伊氏決定讓其於龍泰寺出家，名為「次郎法師」。^[1]

直親直到道高死後的兩年才在弘治元年（1555年）回到井伊家，並迎娶井伊氏家臣奧山親朝（日语：奥山朝利）之女奧山篠（日语：奥山ひよ）為正室。^[1]

永祿3年（1560年）5月，次郎法師之父直盛在桶狹間之戰中戰死，直親繼承家主之位，但在永祿5年（1562年）又因為小野道好（日语：小野道好）（道高之子）的密告也被今川氏真所殺，井伊一族因此受到連累，在舅父新野親矩（日语：新野親矩）（次郎法師母親祐椿尼（日语：祐椿尼）的兄長，今川氏家臣）的幫助下而獲救。

永祿6年（1563年），曾祖父井伊直平在進攻天野氏的犬居城的途中去世。此後新野親矩及井伊氏重臣中野直由（日语：中野直由）也受今川之命討伐曳馬城（引間城）時戰死；由於此時可繼承井伊的男性僅剩下年僅兩歲的直親之子虎松（後來的井伊直政），永祿8年（1565年）身為龍潭寺住持的叔祖父南溪瑞聞推舉次郎法師擔任後見人，同時改名為「直虎」，並以「女地頭」（女領主）之名作為稱呼，成為為井伊氏實際的家督。^[1]

永祿11年（1568年），家老小野道好奪取井伊谷城。在井伊谷三人眾（近藤康用、鈴木重時、菅沼忠久）向德川家康求助後，直虎奪回井伊谷城。元龜3年（1572年）又因為武田氏攻入，井伊谷城再遭武田氏家臣山縣昌景佔領，直到隔年因武田信玄病倒撤軍後直虎才再度取回井伊谷城。

天正10年8月26日（1582年9月12日）直虎死去，家督之位由直政（虎松）繼承。

小說

• 『女（おなご）にこそあれ次郎法師』（梓澤要著、新人物往來社、平成18年（2006年）1月發行）

遊戲

• 戰国大戰（sega 声：古川小百合（1560 SR井伊直虎）、土谷麻貴（15XX SS井伊直虎）、齋藤千和（1590 SR井伊直虎））
• 戰国無雙系列&無雙OROCHI系列（光榮特庫摩、声：齊藤佑圭）
• 戰国IXA （史克威爾艾尼克斯）
• 戰国BASARA 4（卡普空、声：坂本真綾）
• DEAD OR ALIVE 5 Last Round 聲：（齊藤佑圭）

電視劇

• 《女城主 直虎》（2017年NHK大河劇） 柴咲幸飾

• 祖山法忍『井伊家伝記』
  • 国文学研究資料館：井伊家伝記：NO=13、NO=14、NO=24、NO=25、NO=26、NO=27、NO=28、NO=29、NO=30
• 『井伊家傳記』たちばな会 2000年

• 井伊氏（日语：井伊氏）