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六角定赖（1495年—1552年1月21日），六角高賴次子，日本戰國时代南近江的守護大名，官至從四位下彈正忠，諡號江雲，法名雲光寺殿光室亀公大居士。

六角定賴於永正元年（1504年）在京都相國寺出家為僧，稱吉侍者。由於其兄六角氏綱在永正15年（1518年）在與細川家的戰爭中被討死，定賴被迫還俗繼承家業，六角定賴是六角家的一代英主，率軍降伏了淺井家(淺井久政)，成为南近江國霸主，並修建了觀音寺城。

在內政上，率先推出「城割」的命令，要家臣們各自毀掉原有的居城，全部集中於觀音寺城，以方便管理。這道「城割」命令，被認為是後來出現的一國一城令的雛形。 同時也是第一位實施樂市的大名，使觀音寺城的城下町成為眾商雲集的商業都市。 在外交上，以足利將軍支持者的身分，介入當時室町幕府的中央政治。也以政治聯姻的方式，讓自己的子女跟各鄰國大名聯姻。 在定賴的這段領導期間，六角家達到了最全盛的時刻。

1552年逝世後，其子六角義賢繼位。

• 山科本願寺之戰
• 法華一揆
• 舍利寺之戰

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